蜀科離心機(jī)分離植物細(xì)胞膜實(shí)驗(yàn)方法

  蜀科離心機(jī)廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)科學(xué)、生物工程、食品、化工、制藥、環(huán)保等科研和生產(chǎn)單位。今天給大家簡(jiǎn)單介紹一個(gè)用蜀科離心機(jī)分離植物細(xì)胞膜的實(shí)驗(yàn)供大家參考。我們選用的是蜀科的臺(tái)式高速大容量冷凍離心機(jī)。
*步，組織破碎，也可以用研磨的樣本。如果存在大量粗纖維的話，你還可以用紗布過(guò)濾一下。裂解液配方，0.55M 蔗糖；0.76M Tris; 0.02M EDTA; 0.03M 抗壞血酸。用Hcl 調(diào)整HP 到7.8。原料/裂解液 1：2。
第二步，研磨液分3次用蜀科低速冷凍離心機(jī)分離出那些不需要的組織殘?jiān)蚣?xì)胞器。 100G 10min ; 3000G 5min ; 17000G 15min。（速度不夠的話適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間，否則懸浮液中會(huì)存在大量的線粒體之類的細(xì)胞器）。
第三步，上一步得到的懸浮液是含有總膜的懸浮液，一般情況下， 下一步應(yīng)該利用高速離心20000G以上的離心力，把所有的膜沉淀出來(lái)進(jìn)一步純化（這里好用蜀科高速離心機(jī)，推薦選用臺(tái)式高速大容量冷凍離心機(jī)，離心力如果不夠分離不出來(lái)，如果原料非常多的話可能會(huì)析出一些，你也可以試著改變下裂解液的蔗糖濃度，理論上密度變了以后沉降系數(shù)也會(huì)改變，不過(guò)這個(gè)要做大量的計(jì)算工作以確保不影響膜的純度）。純化有PEG/Dextran; 蔗糖梯度兩種方法， 蔗糖梯度比較老了，效果不是很好，但是蔗糖很便宜很好弄。我們用的是6.3%PEG/Dextran 。

   因?yàn)閷?shí)驗(yàn)中需要全程保持0-4度的溫度，所以選用的是蜀科的冷凍離心機(jī)，了解更多實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)操作方法，請(qǐng)收藏并繼續(xù)關(guān)注我們的。