蜀科高速冷凍離心機(jī)在DNA提取中的重要作用

  DNA提取的生物樣品分離實(shí)驗(yàn)，在基因工程和蛋白質(zhì)工程等分子生物學(xué)領(lǐng)域和司法鑒定領(lǐng)域應(yīng)用廣。在DNA提取中，高速冷凍離心機(jī)發(fā)揮著重要的作用，因其中關(guān)鍵的一點(diǎn)是溫度的控制。
  以實(shí)驗(yàn)為例，在細(xì)胞的細(xì)胞核中，DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合形成染色體，因此提取DNA時(shí)既要將蛋白質(zhì)等物質(zhì)除盡，又要盡可能保持DNA分子的完整性，即保持DNA帶不發(fā)生斷裂，無(wú)外源污染。實(shí)驗(yàn)在4℃和常溫條件下分別進(jìn)行。4℃條件下采用高速冷凍離心機(jī)，而常溫條件采用小型臺(tái)式高速離心機(jī)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，4℃條件提取的DNA條帶整齊無(wú)拖帶，而常溫提取的DNA有明顯的拖帶現(xiàn)象，表明前者的DNA片段完整無(wú)斷裂，未被污染，且分子大小相同，而后者的DNA有部分已斷裂。在本實(shí)驗(yàn)采用的有機(jī)法中，由于酚類(lèi)容易被氧化，產(chǎn)生醌、二羧酸等氧化物，可破壞中的磷酸二酯鍵，并引起DNA鏈的交聯(lián)，常溫條件下由于離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生大量熱，加速了酚的氧化，并增加了血液中細(xì)胞釋放的內(nèi)源酶的活性，導(dǎo)致部分基因組DNA降解。而在4℃條件下提取的DNA由于溫度低，酚不易被氧化，內(nèi)源酶活性較低，因此能夠保證DNA的完整性。
  同理，對(duì)生物活性保留要求很苛刻的技術(shù)項(xiàng)目，離心萃取的溫度都需要嚴(yán)格符合要求，超過(guò)溫度區(qū)間范圍會(huì)對(duì)活性酶的指標(biāo)有影響或者溫度過(guò)低導(dǎo)致凝結(jié)。
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